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宁夏地区20种植物丙酮提取物抑菌活性研究
作者:www.cmxx.com 发布于:2014/9/27 18:12:21 点击量:
摘要采用生长速率法和孢子萌发法测定了20种植物丙酮提取物对番茄早疫病菌(Alternaria solani)、玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)的抑制效应。研究结果表明,在供试质量浓度为0.01 g/mL时,老瓜头、蛇果黄堇、小蓝雪花、苦豆子、苍耳、针叶短枝芸香等6种植物提取物对番茄早疫病菌菌丝生长抑制率大于60%,对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌孢子萌发的抑制作用较强,抑制率均在80%以上,其中小蓝雪花提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制率为100%,对2种供试菌孢子萌发的抑制率分别为92.1%和95.3%。   关键词植物提取物;抑菌活性;植物病原菌;宁夏地区   中图分类号 S482.292 文献标识码A文章编号 1007-5739(2010)23-0020-02      AntifungalActivityofAcetoneExtractsfrom20SpeciesofPlantinNingxiaArea   HEYu-ling   (Yinchuan Taifeng Biotechnology Co.,Ltd,Yinchuan Ningxia 750200)   AbstractWith growth rate and spore germination method,biological activity of twenty acetone extracts were assayed against Alternaria solani and Exserohilum turcicum. The results showed that in the tested concentration 0.01 g/mL,six plant extracts had more than 60% inhibition of mycelium growth in A.solani,and more than 80% inhibition of spore germination in A.solani and E.turcicum,they were Cynanchum komarovii Al.iljinski,Corydalis ophiocarpa,Plumbagella micrantha spach,Sophora alopecuroides Linn.,Xanthium sibiricum Patr.,Hap lophyllum tragaccmthoides Dids,and among them,the P.micrantha spach extract produced mycelium growth inhibition of 100% in A.solani,spore germination inhibition of 92.1% and 95.3% in A.solani and E.turcicum.   Key wordsplant extracts;antifungal activity;plant pathogen;Ningxia area      由于化学合成农药本身的特点及其不合理使用,造成对非靶标生物的毒害和环境污染并且导致害物产生抗药性[1],植物源杀菌剂因其具有高效、低残留、对人畜牧安全等特性,受到深入研究。目前,已发现许多植物提取物中含有抑菌活性成分并对其进行了深入研究[2],现已开发的植物源杀菌剂有0.5%小檗碱水剂、1.2%瑞拉菌素EW等[3-4]。本研究对分布于宁夏地区的20种植物的提取物抑菌活性进行了筛选测定,为充分利用宁夏植物资源开发新型植物源杀菌剂提供线索和理论依据。   1材料与方法   1.1供试材料   试验所用植物样品均采自宁夏六盘山、贺兰山、海原、固原等地,共14科20种,经晾干、粉碎过60目筛后于0~4 ℃冰箱中保存备用。取粉碎的植物样品于索氏提取器中,加入丙酮溶剂用索氏提取法提取12 h后,将提取液用旋转蒸发仪浓缩至少量转入量筒中,用丙酮在容量瓶中定容,使供试植物样品的质量浓度为1 g/mL,密封后保存于0~4 ℃冰箱备用。供试菌种为番茄早疫病菌(Alternaria solani)、玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum),均由宁夏大学农学院植物病理实验室提供。   1.2试验方法   1.2.1对病原菌菌丝生长测定[5]。在无菌条件下,供试植物提取液浓度稀释定容为0.01 g/mL,取45 mL的PDA培养基倒入小锥形瓶中,待培养基冷却到40~47 ℃时,取5 mL提取液加入培养基中摇匀,对照组加入等量丙酮溶剂,趁培养基未凝固前倒入60 mm培养皿中制成平板,待平板凝固后放入生长一致的菌饼(=6 mm)。每皿接1个菌饼,每处理重复12次,接种后放到25 ℃的培养箱中培养,分别于72、96 h测定结果。用十字交叉法测量供试真菌菌落生长直径。菌丝生长抑制率计算公式如下:   菌丝生长抑制率=   ■×100%   1.2.2对病原菌孢子萌发测定[5]。在菌丝生长一致的菌种中加入适量无菌水,用毛笔在菌种表面轻轻摩擦制成孢子悬浮液,以2层灭菌纱布将较大的菌丝等杂质过滤,最后制得孢子悬浮液,然后将孢子密度调在低倍镜(15×10倍)每个视野有60~80个孢子为宜。将配好的孢子悬浮液与植物提取物混合配成药剂(质量浓度为0.01 g/mL)。对照组加入适量丙酮,每处理3次,24 h测定结果取平均值。孢子萌发抑制率计算公式如下:   孢子萌发率=■×100%   孢子萌发抑制率=   ■×100%   2结果与分析   2.1对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用   20种植物提取物在同一条件下,不同时间内对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用不同。由表1可知,在供试质量浓度为0.01 g/mL时,老瓜头、蛇果黄堇、小蓝雪花、苦豆子、针叶短枝芸香、苍耳等6种植物提取物在72、96 h时对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制率大于60%。老瓜头、蛇果黄堇、苦豆子提取物在72 h的抑菌率大于80%,96 h时抑菌率有所下降,但是小蓝雪花提取物在不同的时间内对番茄早疫病菌表现出较强的抑菌活性,抑菌率均为100%。   2.2植物提取物对2种植物病原菌孢子萌发的抑制作用   从20种植物中筛选出抑菌活性较高的6种植物提取物,进一步研究了这6种植物提取物对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌孢子萌发的抑制作用。由表2可知,在供试质量浓度为0.01 g/mL时,老瓜头、小蓝雪花提取物对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌孢子的萌发具有强烈的抑制作用,抑制率均大于90%,针叶短枝芸香、苦豆子、苍耳、蛇果黄堇具有一定的抑制作用,抑制率均在80%以上。 3结论与讨论   初步筛选了20种植物提取物的抑菌活性,结果表明老瓜头、小蓝雪花、针叶短枝芸香、苦豆子、苍耳、蛇果黄堇具6种植物的丙酮提取物对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌具有较强的抑菌活性,其中小蓝雪花对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌的孢子萌发的抑制率均在90%以上,对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用达到100%,表现出较强的抑制效果,值得进一步研究。   本研究主要测定了对番茄早疫病菌菌丝生长抑制率大于60%的6种植物提取物,进而研究其对番茄早疫病菌、玉米大斑病菌孢子萌发的抑制作用,其他植物提取物对病原菌孢子萌发是否有抑制作用并没有研究,但这不能确定其他植物对2种病原菌孢子萌发无抑制作用[6]。因为,植物的抑菌机制非常复杂,对一种病原菌没有抑制作用的样品不一定对其他病原菌也没有抑制作用,因此在抑菌活性物质研究中,应综合采用多种方法进行活性物质的追踪。 中国编辑整理。  4参考文献   [1] 徐汉虹.植物化学保护学[M].北京:中国农业出版社,2007:287-295.   [2] 吴传万,杜小凤,徐建明,等.植物源抑菌活性成分研究新进展[J].西北农业学报,2004,13(3):81-88.   [3] 0.5%小檗碱水剂新农药介绍[J].农药科学与管理,2006,25(12):57.   [4] 马晓东,卫军锋,张王斌,等.1.2%瑞拉菌素EW对苹果树腐烂病菌的室内毒力测定和田间药效试验[J].农药,2007,46(2):138-139.   [5] 慕立义.植物化学保护研究方法[M].北京:中国农业出版社,1994:72-80.   [6] 陈利军,尹健,熊建伟,等.7种药用植物提取物抑菌活性测定[J].安徽农业科学,2006,34(21):5562,5571.

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